开展宫颈癌筛查可有效降低宫颈癌的发病率和死亡率。在北美、澳大利亚及欧洲等已有完善筛查制度的国家或地区。这令宫颈癌的发病率和死亡率有明显下降的趋势。但在发展中国家，宫颈癌的发病率和死亡率却没有明显改善。而我国是世界上最大的发展中国家，开展大规模宫颈癌筛查，对提高人类生命质量有着重要的推动作用。

      截止到2019年5月，美国FDA相继批准了共有4家公司拿到了宫颈癌相关高危型HPV检测。除了我们熟知的Hybrid Capture 2，Cervista HPV，Cobas HPV和Aptima HPV外，BD开发的BD Onclarity HPV Assay也在2018年2月获得了FDA的认证，并且正在注册CFDA。

      除Aptima HPV检测外，其余的产品虽然采用不同的技术原理，但都是检测HPV DNA的。Aptima HPV是唯一针对高危型HPV E6、E7 mRNA 的检测，也是目前唯一FDA批准的HPV E6/E7 mRNA检测。

HC2

Hybrid Capture 2简称HC2，于1997年由Digene公司开发，是FDA 最早批准用于诊断HPV的方法，在HPV检测领域作为“金标准”。

HC2-HPV-DNA的技术原理是第二代杂交捕获，本质上是采用RNA探针进行靶标捕获，利用抗体和酶进行信号放大，与现在大热的化学发光具有异曲同工之妙。

利用传统的微孔板，该法可定量检测13种高危型HPV DNA (16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68)。

简单来讲，含有靶标的HPV DNA宫颈细胞样本经过裂解处理，释放HPV DNA链段。释放的HPV DNA链段与HPV RNA探针进行鸡尾酒杂交，并进一步被相应抗体捕获到微孔板上。加入酶标二抗并与固定的杂交体结合后，被化学发光底物检出，发出的光信号在光度计上被测出相对光单位(RLU)，该强度与HPV DNA的含量多少有关，并依次来定量。

由原理可以看出，该法最主要特点是不需要扩增，利用酶触化学发光进行信号放大。配合凯杰公司的自动化仪器，一个检测人员在8h内可以处理患者标本达352例，包括其间自动操作3.5小时。但该法主要限制也在于RNA探针与HPV DNA靶标之间的交叉反应。

Cervista HPV

Hologic是全球著名的医疗技术公司，公司主要通过早期检测和治疗为全球女性带来更多健康和福祉，特别是在乳腺、宫颈、微创手术和骨骼健康等领域，具有一定的领先地位。

Cervista HPV采用的方法是酶切信号放大法（英文可搜索Invader assay），该法与HC2的特点一样，也是不需要扩增的。但一方面与HC2采用化学发光进行信号放大不同，Cervista HPV由Cleavase酶特异性识别并切割目标DNA分子结构，通过识别目标DNA与信号放大两个步骤，直接检测特定核苷酸序列。

酶切信号放大

简单来讲，该法采用Invader寡核苷酸和寡核苷酸探针与靶向HPV DNA序列结合，由于设计了一个重叠序列，因此这两个探针与靶向HPV DNA序列形成了一个侵袭性结构。此时，裂解酶会在重复序列裂解产生许多5端片段，并进一步与通用的发夹荧光共振能量转移器(FRET) 寡核苷酸结合，形成另一个侵袭性结构。在裂解酶的作用下，荧光分子被释放，猝灭的荧光信号恢复。通过荧光信号的强弱就能判断靶向HPV DNA序列的有无。

Cobas HPV

Cobas 4800 HPV检测技术是罗氏公司于2009年11月在欧洲市场推出的。2011年4月，美国FDA批准Cobas 4800 HPV技术用于宫颈标本的检测。

罗氏作为全球顶尖的制药和诊断技术公司，其HPV DNA诊断技术依托其强大的自动化诊断平台Cobas 4800，该平台包括两个步骤：

①自动化样本核酸的分离与纯化

基本原理：样本在高温、蛋白酶、SDS及裂解液的处理下，DNA释放，再由磁珠颗粒吸附捕获。在磁性板架的配合下，通过低pH缓冲液进行DNA的清洗纯化。

②目标DNA序列的PCR扩增及检测

添加PCR缓冲液和DNA聚合酶，完成PCR反应体系的建立，通过β-globin DNA和目标DNA的实时扩增和荧光检测完成整个过程。β-globin DNA的检测作为内质控，对样本的采集、DNA的提取及扩增检测进行全程监控。由于本质上Cobas 4800平台是采用实时荧光定量PCR，技术本身并不复杂，配合其自动化平台，已经能在医院的检验科、病理科、分子中心试验室及传染病研究所等广泛使用。

Aptima HPV

Aptima HPV最早由Gen-Probe公司研发，后来于2012年8月被Hologic收购。

FDA在2011年10月28日批准用于HPV检测的全自动分子诊断检测系统，也是最早的HPV E6/E7 mRNA 检测系统。

AptimaHPV所采用的技术是转录介导等温核酸扩增，具体原理如下图所示。

转录介导等温核酸扩增

转录介导的扩增技术以RNA为模板，利用RNA聚合酶和逆转录酶在约42 ℃等温反应条件下进行扩增，产物为RNA。该技术在每一循环可产生模板的100-1000个拷贝转录本。 

检测HPV E6、E7 mRNA被称为第二代HPV检测技术。由于HPV E6、E7 mRNA是2个致癌蛋白翻译的模板，对其进行检测降低了传统HPV DNA检测对于一过性HPV感染的检出率，能识别出真正有癌变风险的HPV感染。

Onclarity HPV

BD Onclarity HPV Assay HPV检测技术由美国BD公司（Becton, Dickinson and Company）研发，于2018年2月12日由FDA批准的最新HPV检测方法。

该方法主要依托BD Viper LT系统，系统内部集成了核酸提取、扩增和检测，能自动进行样品处理、核酸提取、即时聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增检测以及结果报告，将最小化降低人为干预，所采用的技术原理主要是实时荧光定量PCR。

与罗氏的产品不同，Onclarity 也是以HPV E6、E7 DNA作为靶点进行HPV检测，能一次性检测14种高危HPV（16，18，45，31，33，35，39，51，52，56，58，59，66和68）。

需要说明的是，目前国内海尔施也开发了一套基于HPV E6/E7 DNA分型检测试剂，并获得了CFDA和CE的认证。