关于HPV

       HPV是一种细微的DNA病毒，呈球形，无包膜，20面体立体对称结构，表面有72个壳微粒，内含8000个碱基对(bp)，分子量为5×106D，其中88％是病毒蛋白，该病毒直径约为45-55nm，它们在机体内都会形成一个难以清除的闭合环状DNA结构（HPV是episome（附加体）形式）。

      HPV进入机体后会持续感染以保持基因组完整，随后病毒基因组中的一部分形成episome。之后，病毒就丧失了包装出完整病毒粒子的能力（因为基因组缺失了）。episome会勾在人体基因组中，导致HPV基因组会机会性整合进人体的基因组中。

      HPV基因组是双链环状DNA，基因组编码为9个开放读码框架，分为3个功能区：即早期转录区、晚期转录区和非转录区(控制区)。

      早期转录区又称为E区，分别编码为E1、E2、E3、E4、E5、E6、E7、E8等8个早期蛋白，具有参与病毒DNA复制、转录、翻译调控和细胞转化等功能。

      晚期转录区又称为L区，编码2个衣壳蛋白（即主要衣壳蛋白L1和次要衣壳蛋白L2），组成病毒的衣壳，且与病毒的增殖有关。

       非转录区又称为上游调节区、非编码区或长调控区，位于E8和L1之间。该区含有HPV基因组DNA的复制起点和HPV基因表达所必不可少的调控元件，以调控病毒的转录与复制。

                                       HPV基因组的主要功能

关于HPV的DNA（E2、E6、E7）

      随着分子生物学的不断进展，近些年来对HPV的各功能区，特别是对E2、E6、E7的研究又有了新的认识。

      E6 和 E7 为病毒癌基因，可影响细胞周期的调控，被认为在细胞转化及在肿瘤形成中起着关键作用，参与并调控宿主细胞的病毒基因表达和复制。

      E6还能激活端粒酶，使细胞不能正常凋亡。

      E6和E7蛋白不仅具有转化和致癌作用，而且还具有对病毒基因和细胞基因转录的反式激活活性。

      E6 蛋白与 p53 ，E7 蛋白与 Rb 蛋白结合，使细胞逃脱p53和Rb的控制，导致这两种抑癌基因失活，使通常处于静止状态的细胞增生活跃、肿瘤生长，从而引起正常组织细胞周期发生改变和细胞恶性转化。

      现认为E2蛋白是一种特异性的DNA束缚蛋白，可以调节病毒mRNA的转录和DNA的复制，并有减量调节E6、E7表达的作用。

      E2蛋白还可以通过结合病毒启动子附近的基因序列而抑制转录起始。

      当E2完整性遭到破坏后，负反馈调节功能也即消失，引起致癌性基因E6、E7过量表达，从而导致癌变的顺向推进。

      在HPV整合过程中，许多基因被破坏或缺失，其中E2基因受到的破坏最为严重。E2基因破坏是由 HPV整合引起导致宫颈病变进行性进展的一个重要事件，并且E2基因的破坏程度与宫颈病变的进展呈正相关性。

      总之，在HPV诱导的肿瘤中，HPV病毒基因随机整合到宿主染色体内，导致E2基因破坏和E2基因低水平表达或表达缺失，造成HPV病毒生命周期的中止，及对致癌基因 E6和 E7调节的紊乱，E2缺失解除了对E6、E7表达的抑制，这是肿瘤基因起源的关键一步。因此，作为保护性蛋白 E2基因一旦被破坏，势必造成宫颈病变的恶性进程。

      由上可知，在HPV病毒中，E6、E7、E2蛋白在病毒复制和致癌机制中起到至关重要的作用。那么，控制E2蛋白可以作为我们研究杀灭病毒的突破口。

施法迪®抗菌凝胶作用

       盛华医药在2005年的专利中就已经对染色体病毒的感染、传播、复制机制进行详尽研究和阐述，提出通过控制整合酶和病毒蛋白的方法清除HPV以及HIV病毒的理论思路，该研究获得全球在内包括中国88个国家的专利，并根据专利的理论研制出施法迪®抗菌凝胶产品。

       在作用机理上充分体现专利研究中对病毒控制的思路和方法，通过增强E2蛋白而达到抑制E6、E7蛋白的目标，使E6无法实现阻止病毒凋亡等功能、E7无法实现让细胞永生化等功能，从而实现让病毒无法复制并引导病毒凋亡。施法迪产品在临床上也进行了充分验证，对HPV病毒呈现高效的杀灭作用。

施法迪®抗菌凝胶机理

      2015年，盛华医药委托CRO进行了施法迪产品对基因影响的深入研究实验。

      通过产品， 深入验证HPV病毒中各蛋白的功能和机理，杀灭HPV病毒以及对人类子宫颈癌的作用机理和效果，并对宫颈癌CIN1和CIN2阶段的药理机制进行研究。

      我们用real-time PCR 方法，检测施法迪产品和阳性对照物Aphidicolin处理过的CaSki细胞和SiHa细胞（均为人子宫颈癌细胞）中HPV16 E6，HPV16 E7以及CaSki细胞中HPV16 E2的基因量和mRNA量。

      从下图实验数据显示，施法迪产品对HPV E2蛋白不仅没有抑制作用，在48小时的实验数据中，更显示对E2有明显的增强作用。

        从下图实验数据还看出，施法迪产品对HPV E6蛋白的抑制率达到90.89，对E7蛋白的抑制率达到94.51。由此可见产品对E6蛋白和E7蛋白均有强力的抑制作用。（X轴是剂量，Y轴是抑制率）

      由上述实验数据可清晰看出，经施法迪产品处理的Caski细胞和SiHa细胞（均为人子宫颈癌细胞），在48小时能显著抑制细胞中HPV16 E6 和 HPV16 E7 基因量和mRNA量。

      且处理48小时后，HPV16 E2 基因量升高，从而能显著抑制CaSki细胞和SiHa细胞中HPV16 E6和 HPV16 E7基因量和mRNA量。

      同时，我们用real-time PCR 方法检测施法迪处理过的Hela细胞中HPV18 L1的基因量和mRNA量。 研究表明，施法迪能显著抑制Hela细胞中HPV18 L1 基因量和mRNA量。

      最后，我们测试了C33-A细胞（人子宫颈癌细胞）中HPV16 E2， HPV16 E6， HPV16 E7 及HPV18 L1的基因量和mRNA量，表明C33-A细胞（人子宫颈癌细胞）为HPV阴性细胞（实验结束）。　

      经过上述实验，充分证明施法迪®产品对HPV病毒以及人子宫颈癌中的HPV病毒有显著的抑制和杀灭作用。